使用組織細(xì)胞固定液的意義
使用組織細(xì)胞固定液,簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是起到固定的目的。具體來(lái)說(shuō)有以下幾種作用:
1、能防止細(xì)菌的腐蝕和組織的自溶。細(xì)菌無(wú)處不存在,它們隨時(shí)都可污染腐蝕未經(jīng)處理的組織。組織細(xì)胞固定液可以固定任何蛋白質(zhì),凡有生命的東西,都由蛋白質(zhì)組成,蛋白質(zhì)被固定,生命就停止,細(xì)菌也就失去了活力。另者,在日常生活中,人們??膳龅竭@樣的問(wèn)題,一塊肉不經(jīng)處理放了幾天后就會(huì)變質(zhì),這是為什么呢?除了細(xì)菌參與外,其本身也是很重要的。因?yàn)榻M織離體后,供應(yīng)這此組織的血液隨之消失,細(xì)胞缺氧,細(xì)胞內(nèi)溶酶體膜的結(jié)構(gòu)受到破壞,破壞后釋放出溶酶體酶,日常生活中常碰到的肉變質(zhì),就是細(xì)菌污染加組織自溶的結(jié)果。
2、保存細(xì)胞固有的物質(zhì),能凝固或沉淀細(xì)胞內(nèi)或組織液,糖原等,使細(xì)胞或組織基本上保持與生活時(shí)的物質(zhì)一樣。細(xì)胞的固有物質(zhì),即細(xì)胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、高爾基器、溶酶體、過(guò)氧體,細(xì)胞骨架,組織液,抗原、糖元等。這些物質(zhì),如果不將其及時(shí)固定,是很容易喪失的,尤其是溶酶體,很容易受到破壞,因此應(yīng)特別小心。
3、保存好大體標(biāo)本。對(duì)于有教學(xué)任務(wù)的醫(yī)院病理科,除搞好疾病的診斷外,還有收集有價(jià)值的大體標(biāo)本,有些大體標(biāo)本,是很難得到的。因此要求在平時(shí)就要留心觀察,小心處理。遇到有教學(xué)價(jià)值的罕見(jiàn)的典型的標(biāo)本,就必須及時(shí)固定,認(rèn)真給予對(duì)待。
4、使組織硬化,便于切塊。剛離體的組織,除了胃組織以外,都是柔軟的組織,尤其是胃腸道的組織,如果在沒(méi)有固定時(shí)就取材,效果就很差,不是取材不規(guī)整,就是厚薄不均,粘膜和肌層很容易分開(kāi),因此,要取得規(guī)整標(biāo)致的材料,就必須將組織*固定,再行取材。
5、對(duì)某些具有傳染性的標(biāo)本,能防止疾病的擴(kuò)散。病理標(biāo)本、種類(lèi)繁多,成份復(fù)雜,各種病例都有,具有傳染性的病種也不少,如結(jié)核、肝炎、麻風(fēng)、性病等等。對(duì)于此類(lèi)標(biāo)本,應(yīng)進(jìn)行*的固定后,再行取材,如結(jié)核球,固定時(shí)間應(yīng)在3-5天。
6、可增強(qiáng)染色的作用。組織經(jīng)過(guò)及時(shí)的固定,zui終可見(jiàn)到切片有鮮艷的染色,而如果有一批未經(jīng)及時(shí)固定的組織,將看到zui終的結(jié)果是,核染色不清楚,灰淡色,由此可得結(jié)論,固定可以增強(qiáng)染色的作用。
使用組織細(xì)胞固定液的要點(diǎn)有以下幾點(diǎn):
1、組織固定越新鮮越好。組織一經(jīng)離體,就能及時(shí)地固定,這是的。根據(jù)實(shí)驗(yàn),如果要獲得某些酶的染色,固定在組織離體后30秒至1分鐘。對(duì)于其它達(dá)不到些要求是越快越好。
2、組織固定,組織塊不宜過(guò)大。凡是需要固定的組織,都不應(yīng)該太大太厚,這是因?yàn)樗械墓潭ㄒ捍┩噶Σ粔驈?qiáng),浸透度不夠快的緣故。如果較大厚的組織,不經(jīng)處理就進(jìn)行固定,那么待固定液進(jìn)入至中間對(duì)可能這些組織早就發(fā)生自溶了。因此,對(duì)于較大的組織,必須先進(jìn)行處理,切成制片材料再行固定,這是*的處理方法。
3、組織固定,時(shí)間不宜太短,也不宜太長(zhǎng)。時(shí)間太短,就不能很多的固定組織,因?yàn)椴还芙M織大小,固定液浸入組織之中,都需要有一定的時(shí)間,時(shí)間太短,就會(huì)影響組織固定的效果,對(duì)以后一系列關(guān)系的處理都有影響,切片質(zhì)量難以保證,固定時(shí)間太長(zhǎng),也不好。組織長(zhǎng)時(shí)間的固定,福爾馬林會(huì)產(chǎn)生一種酸,影響核的染色。
4、對(duì)不同類(lèi)型的組織應(yīng)適當(dāng)合理地選擇組織細(xì)胞固定液,特殊病例或特殊物質(zhì)應(yīng)選擇特殊的組織細(xì)胞固定液。有的固定液對(duì)于組織有膨脹作用。固定劑是一種化學(xué)試劑,有液體和固體之分,一般使用較多的是液體,而固體固定劑如多聚甲醛,則多用于實(shí)驗(yàn)研究的組織固定。
5、組織的第二次固定或后固定。在一般的常規(guī)病理活檢組織中,往往用一種組織細(xì)胞固定液,就能夠達(dá)到目的,獲得滿意的結(jié)果。但是,對(duì)于某些特殊病例光用一種固定液是不夠的,必須根據(jù)不同的情況,使用特殊的固定液再次將組織固定,或者在切片后染色前再行固定。這種方法稱為二次固定或后固定。