產(chǎn)品信息
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
FS1026-500T | BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白濃度測定試劑盒(增強型) | 500T | 280.00 |
FS1026-2500T | BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白濃度測定試劑盒(增強型) | 2500T | 800.00 |
FS1026-5000T | BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白濃度測定試劑盒(增強型) | 5000T | 1500.00 |
BCA蛋白濃度測定試劑盒(蛋白提取與定量)BCA蛋白濃度測定試劑盒(蛋白提取與定量)
產(chǎn)品描述
BCA(Bicinchoninic acid)法是目前應(yīng)用比較廣泛的蛋白質(zhì)濃度測定方法?;陔p縮脲反應(yīng),即在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)將Cu2+還原成Cu+,產(chǎn)生一種紫藍色復(fù)合物,在562nm處有高的吸光值,該反應(yīng)產(chǎn)物的量與蛋白質(zhì)濃度成正比。BCA蛋白濃度測定法實現(xiàn)了蛋白質(zhì)濃度測定的簡便、靈敏、快速和穩(wěn)定性。試劑盒中提供的蛋白標準品為用戶制作標準曲線提供了便利。
該BCA蛋白濃度測定試劑盒可用于比色皿法檢測,也可用于微孔板法檢測。前者雖需較大量(100μl)的蛋白樣品,但由于其在檢測中使用蛋白樣品與BCA工作液的比率為1:20(v/v),從而降低干擾物質(zhì)帶來的影響。后者操作簡單方便,僅需少量(10-25μl)的蛋白樣品。不過,由于其在檢測中使用蛋白樣品與BCA工作液的比率為1:8(v/v),某種程度上限制干擾物質(zhì)的承受濃度以及降低**檢測水平。我司提供三種規(guī)格的BCA蛋白濃度檢測試劑盒,比色皿法分別可做50次,250次,500次。酶標法分別可做500次,2500次,以及5000次。
產(chǎn)品特點
室溫運輸。試劑盒室溫保存即可,其中短期不用的蛋白標準品(BSA)也可放到4 ºC保存。有效期12個月。
注意事項
操作方法
一、配制標準品和工作液
1. 配制BSA標準品體系
注:標準品稀釋液為蛋白樣品的溶解液,原則上蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但也可用0.9%的NaCl或1×PBS進行稀釋。
BSA標準品體系配制可參考表一。
表一BSA標準品體系配制(微孔板檢測,線性范圍20-2000μg/ml)*
Vial | 稀釋液體積(μl) | 2mg/ml BSA體積(μl) | BSA終濃度(μg/ml) |
A | 0 | 100 | 2000 |
B | 25 | 75 | 1500 |
C | 50 | 50 | 1000 |
D | 125 | 75 | 750 |
E | 150 | 50 | 500 |
F | 350 | 50 | 250 |
G | 375 | 25 | 125 |
H | 395 | 5 | 25 |
I | 400 | 0 | 0=Blank |
*如用比色皿檢測,每管需加100μl標準品,按3個重復(fù)計算,每個濃度至少需配制300μl。
2. 配制BCA工作液
二、檢測方法
1. 比色皿檢測方法(樣品:BCA工作液=1:20)
1) 各取100μl標準品和待測樣品加入到反應(yīng)管中。
2) 每管加入2.0ml BCA工作液,混勻。37℃孵育30min。
注意:也可室溫孵育2h,或者60℃孵育30min。BCA檢測蛋白濃度,延長孵育時間會加深顏色反應(yīng)。升高溫度會加快顯色反應(yīng)。但是溫度升高和時間延長會降低檢測下限,以及降低工作線性范圍。若蛋白濃度很低,可在較高溫度孵育或者適當延長孵育時間。
2. 微孔板檢測方法(樣品:BCA工作液=1:8)
1) 各取25μl標準品和待測樣品加入到微孔板中。
注:樣品與工作液比例為1:8,若樣品有限,可使用10μl標準品和待檢測樣品進行檢測(即1:20),這時試劑盒的檢測范圍為125-2000μg/ml。
2) 每孔加入200μl BCA工作液,振蕩30s充分混勻。蓋上微孔板,37℃孵育30min。